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COSMOSIL色譜柱的應(yīng)用和原理概述

更新時(shí)間:2023-04-21瀏覽:844次

  一、除堿溶液和強(qiáng)酸溶液(pH1.5以下)以外都可以使用。(強(qiáng)堿溶液會(huì)使硅膠溶化,強(qiáng)酸溶液會(huì)使固定相脫落)
 
  注意點(diǎn):溶劑粘度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致壓力上升,請(qǐng)將壓力控制在20Mpa以下。使用酸性流動(dòng)相或凝固點(diǎn)高的溶劑后,必須清洗色譜柱。使用不含緩沖液,鹽,酸的流動(dòng)相沖洗10-15分鐘。例:流動(dòng)相為甲醇/磷酸緩沖液(20mmol/L)=50/50時(shí),就使用甲醇/水=50/50沖洗,長(zhǎng)期(1個(gè)月以上)保存:使用后,先用不含酸和鹽的流動(dòng)相清洗色譜柱,再將流動(dòng)相置換為乙腈/水=70/30或甲醇/水=70/30。
 
  二、色譜柱使用時(shí)間后就會(huì)出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時(shí)間改變等變化,如不采取措施,將會(huì)縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。常用的色譜柱填充劑有硅膠和化學(xué)鍵合硅膠、離子交換樹(shù)脂、凝膠或玻璃微球等填充劑。在化學(xué)鍵合硅膠中以十六烷基硅烷鍵合硅膠常用,辛基硅烷鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用。
 
  三、硅膠基的疏水反應(yīng)柱既可克服樹(shù)脂基填料溶脹的缺點(diǎn)。硅膠基柱與樹(shù)脂基的柱相比又能能提供比較高的耐壓性能和流速。載量也比較高。尤其適合分離酶失活也比較少。比樹(shù)脂基的疏水柱價(jià)格便宜。在分離生物分子蛋白和酶中特別有用。離子交換柱提供了玻璃柱和TOSOH的產(chǎn)品相當(dāng)?shù)珒r(jià)格較為便宜。

 

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