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淺析YMCC18填料的裝填方法

更新時(shí)間:2019-01-24瀏覽:1586次

  精細(xì)分離YMCC18填料是在大孔吸附樹(shù)脂的基礎(chǔ)上進(jìn)行設(shè)計(jì)和改良的,基體是聚苯乙烯基共聚物或聚甲基丙烯酸酯共聚物。精細(xì)反相分離YMCC18填料具有高比表面積,能夠耐酸、堿,可以在pH1-14范圍內(nèi)使用,而且與傳統(tǒng)的大孔吸附樹(shù)脂相比,粒徑分布范圍窄,顆粒粒徑小,可以裝填出具有較高柱效的色譜柱,達(dá)到對(duì)物質(zhì)的精細(xì)分離。可用于分析和制備純化產(chǎn)品。常用于反相色譜體系,用于純化、分離植物提取物單體、小分子藥物、多肽、核酸、蛋白質(zhì)等。以下是精細(xì)YMCC18填料的裝填方法。
  裝填前準(zhǔn)備
  1.裝填前準(zhǔn)備工作:
  1)柱子清洗干凈檢查沒(méi)有明顯的破損。
  2)檢測(cè)密封是否嚴(yán)格。
  3)柱子要豎立與地面垂直。
  4)在裝柱前要用裝柱的溶劑沖刷色譜柱、柱篩板、管路等。
  所需要的設(shè)備有:泵(蠕動(dòng)泵或恒流泵)、壓力表、水平儀、玻璃/或不銹鋼層析柱、燒杯或其他容器等。
  2.去除小顆粒
  樹(shù)脂裝填前需要去除小顆粒,因?yàn)檫@種小顆粒會(huì)堵塞篩板或砂芯造成整個(gè)柱子壓降增加,而且YMCC18填料的粒徑分布太廣也不利于裝填后柱子的柱效,因此在柱子裝填前要把小顆粒除去。去除步驟如下:
  1)將樹(shù)脂倒入到適宜的容器中,加入乙醇,玻璃棒攪拌后靜止。加入乙醇的體積和靜止的時(shí)間決定了樹(shù)脂粒徑的大小。
  2)將樹(shù)脂溶液表面的懸浮物輕輕倒走或抽走。
  3)加入新的乙醇溶液,重復(fù)上述1),2)步驟。直到溶液澄清看不到小顆粒為止。
  一、裝填
  1.勻漿
  根據(jù)所需裝填柱子的體積稱取適量的YMCC18填料到容器里,容器的體積至少是勻漿體積的2倍,再根據(jù)具體的裝填方式和裝填的YMCC18填料的類型按照表一、二、三制成合理的勻漿。為了充分溶脹,建議可提前將YMCC18填料浸泡在裝填溶劑中過(guò)夜。
  2.裝填
  1)將柱底篩板用裝填溶劑潤(rùn)濕,并將溶液放空一部分以便趕走所有的氣泡。關(guān)閉柱底端出口,并在柱底部留出1~2cm高的裝填溶劑。
  2)再次將漿液攪拌均勻,以確保YMCC18填料的均一。
  3)小心將勻漿液倒入層析柱中,并注意避免倒入時(shí)產(chǎn)生氣泡。
  4)將勻漿液倒入后,用裝有裝填溶劑的噴壺清洗層析柱的內(nèi)壁。
  5)自然沉降或抽真空加速沉降,逐步添加至YMCC18填料填滿色譜柱。
  6)將柱頂端密封,與泵連接,打開(kāi)柱底開(kāi)關(guān)打入裝填溶劑,流速逐漸加大到目標(biāo)流速。
  7a恒流速裝填法:利用蠕動(dòng)泵或恒流泵緩慢增加至終流速,這可以避免液壓對(duì)于所形成的柱床的沖擊,也可以避免柱床形成的不均勻。流速可以階段性地增大,增加量取決于層析柱的柱尺寸和流速。柱床被壓縮后。在柱床上部會(huì)有空隙,可以補(bǔ)充YMCC18填料,重復(fù)加壓至YMCC18填料裝填滿色譜柱。一般來(lái)說(shuō)裝填流速是平時(shí)常用流速的2-3倍。
  7b.軸向柱裝填法緩慢增加至目標(biāo)壓力,這可以避免液壓對(duì)于所形成的柱床的沖擊,也可以避免柱床形成的不均勻。可以通過(guò)手動(dòng)操作減少流速來(lái)獲得形成柱床所需要的穩(wěn)定壓力。對(duì)于YMCC18填料裝填一般的壓力5-15bar。
  8.當(dāng)柱床終形成后,關(guān)閉泵,并關(guān)閉層析柱出口,色譜柱裝填完成。
  9.色譜柱裝填后為清洗色譜柱和使柱床均一穩(wěn)定,可以用泵在使用流速下利用裝填溶劑清洗柱床5-10倍柱體積。

 

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